Klinik örneklerde mycobacterium tuberculosis varlığının gösterilmesinde Xpert MTB/RIF sonuçlarının değerlendirilmesi
Yıl: 2011 Cilt: 45 Sayı: 1 Sayfa Aralığı: 43 - 47 Metin Dili: Türkçe İndeks Tarihi: 29-07-2022
Klinik örneklerde mycobacterium tuberculosis varlığının gösterilmesinde Xpert MTB/RIF sonuçlarının değerlendirilmesi
Öz: Tüberküloz tüm dünyayı tehdit eden temel bir sağlık problemidir. Mycobacterium tuberculosis kompleksin hızlı tanısında nükleik asit amplifikasyon testleri Dünya Sağlık Örgütü (DSÖ) tarafından da önerilen popüler testler halini almıştır. Son zamanlarda kullanıma sunulan Xpert MTB/RIF (Cepheid, ABD) sistemi de, gerçek zamanlı polimeraz zincir reaksiyonu (PCR) mekanizmasına dayanan ticari bir moleküler yöntemdir. Bu bütünleşik sistemde; örneklerin işlenmesi, nükleik asit izolasyonu, amplifikasyon ve rifampisin direnci ile ilişkili bilinen mutasyonların saptanması işlemleri tek bir kartuş içerisinde gerçekleşmekte ve iki saat gibi kısa bir süre içinde sonuç alınabilmektedir. Bu çalışmanın amacı, ön işlem uygulanmamış klinik örneklerde M.tuberculosis varlığının saptanmasında Xpert MTB/RIF sisteminin performansının, Bactec 460TB 12B (BD Diagnostic, ABD), Löwenstein-Jensen (LJ) kültürü ve Ziehl-Neelsen (ZN) ile direkt mikroskopik inceleme yöntemleriyle karşılaştırmalı olarak değerlendirilmesidir. Çalışmaya, tüberküloz şüpheli hastalara ait 50 balgam, 25 bronkoalveoler lavaj, beş torasentez sıvısı ve beş idrar olmak üzere toplam 85 örnek dahil edilmiştir. Tüm örnekler dekontamine edilmiş ve çalışmalar Xpert MTB/RIF hariç, dekontamine örnek süspansiyonundan gerçekleştirilmiştir. Çalışmamızda incelenen 85 örneğin 25 (%29)’inde Bactec 460TB, 25 (%29)’inde Xpert MTB/RIF, 15 (%18)’inde LJ ve 11 (%13)’inde ZN boyama yöntemi ile pozitif sonuç elde edilmiştir. Bactec 460TB sonuçları referans olarak alındığında, Bactec 460TB ile Xpert MTB/RIF arasında anlamlı olarak yüksek düzeyde korelasyon saptanmıştır (r= 0.943, p= 0.000). Referans teste göre Xpert MTB/RIF sistemi ile bir örnekte yanlış pozitiflik belirlenmiş ve Xpert MTB/RIF testinin duyarlılık, özgüllük, pozitif ve negatif öngörü değerleri sırasıyla %96, %98, %96 ve %98 olarak hesaplanmıştır. Çalışma kapsamında izole edilen suşlar için direnç saptanmamıştır. Bu çalışma ile Xpert MTB/RIF sisteminin mikroskopi negatif ve pozitif örnekler için referans testle benzer duyarlılığa sahip olduğunu destekleyen veriler elde edilmiştir. Ayrıca, Xpert MTB/RIF sonuçlarının iki saatten kısa zamanda alınmasının önemli bir avantaj olduğu düşünülmüştür.
Anahtar Kelime: Konular:
Evaluation of Xpert MTB/RIF results for the detection of mycobacterium tuberculosis in clinical samples
Öz: Tuberculosis is still a major global health problem. Nowadays nucleic acid amplification tests which are recommended by the World Health Organization (WHO) become popular methods for the rapid detection of Mycobacterium tuberculosis complex (MTC). Recently introduced commercial Xpert MTB/RIF (Cepheid, USA) system is also a molecular method based on real-time polymerase chain reaction for simultaneous detection of both MTC and rifampicin resistance in the clinical sample. The sample processing, nucleic acid extraction, amplification and detection of known mutations related to rifampicin resistance are performed in a single cartridge in this integrated system and the results are obtained in two hours. The aim of this study was to evaluate the performance of Xpert MTB/RIF system for the detection of M.tuberculosis in pre-processed clinical samples by comparing the results obtained by Bactec 460TB 12B (BD Diagnostic, USA), Löwenstein-Jensen (LJ) culture and direct microscopy of smears stained with Ziehl- Neelsen (ZN). A total of 85 clinical specimens (50 sputum, 25 bronchoalveolar lavage, five thorasynthesis fluid and five urine samples) obtained from tuberculosis-suspected patients were included to the study. All specimens were decontaminated and this decontaminated suspension was used in the diagnostic methods, except for Xpert MTB/RIF process. Twenty-five (29%) of the samples yielded positive result with Bactec 460TB, 25 (29%) were found positive with Xpert MTB/RIF, 15 (18%) were found positive with LJ and 11 (13%) were found positive with ZN staining method. High consistency was detected between the results of Bactec 460TB and Xpert MTB/RIF when Bactec 460TB was considered as the gold standard method (r= 0.943; p= 0.000). One specimen yielded false positive result with Xpert MTB/RIF when compared to the reference method. The sensitivity, specificity, positive and negative predictive values of Xpert MTB/RIF test were then estimated as 96%, 98%, 96% and 98%, respectively. No resistance were detected for the tested isolates. This study suggested that the sensitivity of Xpert MTB/RIF system in direct detection of M.tuberculosis in smear positive and smear negative samples was consistent with the reference methods. Moreover, the MTB/RIF test provided sensitive detection of tuberculosis in less than two hours.
Anahtar Kelime: Konular:
Belge Türü: Makale Makale Türü: Araştırma Makalesi Erişim Türü: Bibliyografik
- 1. American Thoracic Society. Diagnostic standards and classification of tuberculosis in adults and children. Am J Respir Crit Care Med 2000; 161(4): 1376-95.
- 2. Cesur S, Hoca NT, Tarhan G, et al. Evaluation of Quantiferon-TB Gold and tuberculin skin test in patients with tuberculosis, close contact of patients, health care workers and tuberculosis laboratory personnel. Mikrobiyol Bul 2010; 44(4): 553-60.
- 3. Kıyan M. Mycobacteriaceae, s: 419-57. Cengiz AT, Ustaçelebi Ş (ed), Temel ve Klinik Mikrobiyoloji. 1999, Güneş Kitabevi, Ankara.
- 4. Esen N, Özkütük A, Çoban H, Atlas E. Three step MIRU-VNTR for routine mycobacteriology laboratory practice. Mikrobiyol Bul 2010; 44(3): 375-83.
- 5. Seber E. Tüberküloz laboratuvar tanı yöntemleri: Löwenstein Jensen besiyeri ile antitüberküloz duyarlılık testi (Modifiye orantılama dilüsyon testi), s: 467-76. 21. Yüzyılda Tüberküloz Sempozyumu ve 2. Tüberküloz Laboratuvar Tanı Yöntemleri Kursu Kitabı. 2003, Klimik ve Toraks Derneği, İstanbul.
- 6. Kwara A, Schiro R, Cowan LS, et al. Evaluation of the epidemiologic utility of secondary typing methods for differentiation of Mycobacterium tuberculosis isolates. J Clin Microbiol 2003; 41(6): 2683-5.
- 7. Durmaz R. Mycobacterium tuberculosis suşlarında direncin belirlenmesinde moleküler yöntemler: Son gelişmeler. ANKEM 2010; 24 (Ek 2): 64-70.
- 8. http://www.cepheidinternational.com/tests-and-reagents/ce-ivd-test/xpert-mtbrif/
- 9. Helb D, Jones M, Story E, et al. Rapid detection of Mycobacterium tuberculosis and rifampin resistance by use of on-demand, near-patient technology. J Clin Microbiol 2010; 48(1): 229-37.
- 10. Bodmer T, Ströhle A. Diagnosing pulmonary tuberculosis in a low prevalence setting-the Xpert MTB/RIF test. 20th European Congress of Clinical Microbiology and Infectious Diseases (ECCMID), 10-13 April 2010, Vienna, Austria. P2048.
- 11. Boehme CC, Nabeta P, Hillemann D, et al. Rapid molecular detection of tuberculosis and rifampin resistance. N Engl J Med 2010; 363(11): 1005-15.
| APA | ÇİFTCİ İ, ASLAN M, AŞIK G (2011). Klinik örneklerde mycobacterium tuberculosis varlığının gösterilmesinde Xpert MTB/RIF sonuçlarının değerlendirilmesi. , 43 - 47. |
| Chicago | ÇİFTCİ İHSAN HAKKI,ASLAN MEHTAP HÜLYA,AŞIK Gülşah Klinik örneklerde mycobacterium tuberculosis varlığının gösterilmesinde Xpert MTB/RIF sonuçlarının değerlendirilmesi. (2011): 43 - 47. |
| MLA | ÇİFTCİ İHSAN HAKKI,ASLAN MEHTAP HÜLYA,AŞIK Gülşah Klinik örneklerde mycobacterium tuberculosis varlığının gösterilmesinde Xpert MTB/RIF sonuçlarının değerlendirilmesi. , 2011, ss.43 - 47. |
| AMA | ÇİFTCİ İ,ASLAN M,AŞIK G Klinik örneklerde mycobacterium tuberculosis varlığının gösterilmesinde Xpert MTB/RIF sonuçlarının değerlendirilmesi. . 2011; 43 - 47. |
| Vancouver | ÇİFTCİ İ,ASLAN M,AŞIK G Klinik örneklerde mycobacterium tuberculosis varlığının gösterilmesinde Xpert MTB/RIF sonuçlarının değerlendirilmesi. . 2011; 43 - 47. |
| IEEE | ÇİFTCİ İ,ASLAN M,AŞIK G "Klinik örneklerde mycobacterium tuberculosis varlığının gösterilmesinde Xpert MTB/RIF sonuçlarının değerlendirilmesi." , ss.43 - 47, 2011. |
| ISNAD | ÇİFTCİ, İHSAN HAKKI vd. "Klinik örneklerde mycobacterium tuberculosis varlığının gösterilmesinde Xpert MTB/RIF sonuçlarının değerlendirilmesi". (2011), 43-47. |
| APA | ÇİFTCİ İ, ASLAN M, AŞIK G (2011). Klinik örneklerde mycobacterium tuberculosis varlığının gösterilmesinde Xpert MTB/RIF sonuçlarının değerlendirilmesi. Mikrobiyoloji Bülteni, 45(1), 43 - 47. |
| Chicago | ÇİFTCİ İHSAN HAKKI,ASLAN MEHTAP HÜLYA,AŞIK Gülşah Klinik örneklerde mycobacterium tuberculosis varlığının gösterilmesinde Xpert MTB/RIF sonuçlarının değerlendirilmesi. Mikrobiyoloji Bülteni 45, no.1 (2011): 43 - 47. |
| MLA | ÇİFTCİ İHSAN HAKKI,ASLAN MEHTAP HÜLYA,AŞIK Gülşah Klinik örneklerde mycobacterium tuberculosis varlığının gösterilmesinde Xpert MTB/RIF sonuçlarının değerlendirilmesi. Mikrobiyoloji Bülteni, vol.45, no.1, 2011, ss.43 - 47. |
| AMA | ÇİFTCİ İ,ASLAN M,AŞIK G Klinik örneklerde mycobacterium tuberculosis varlığının gösterilmesinde Xpert MTB/RIF sonuçlarının değerlendirilmesi. Mikrobiyoloji Bülteni. 2011; 45(1): 43 - 47. |
| Vancouver | ÇİFTCİ İ,ASLAN M,AŞIK G Klinik örneklerde mycobacterium tuberculosis varlığının gösterilmesinde Xpert MTB/RIF sonuçlarının değerlendirilmesi. Mikrobiyoloji Bülteni. 2011; 45(1): 43 - 47. |
| IEEE | ÇİFTCİ İ,ASLAN M,AŞIK G "Klinik örneklerde mycobacterium tuberculosis varlığının gösterilmesinde Xpert MTB/RIF sonuçlarının değerlendirilmesi." Mikrobiyoloji Bülteni, 45, ss.43 - 47, 2011. |
| ISNAD | ÇİFTCİ, İHSAN HAKKI vd. "Klinik örneklerde mycobacterium tuberculosis varlığının gösterilmesinde Xpert MTB/RIF sonuçlarının değerlendirilmesi". Mikrobiyoloji Bülteni 45/1 (2011), 43-47. |
