FARE ÖSTRUS SİKLUSU'NUN FARKLI FAZLARINDA PLIN2 VE PLIN3 EKSPRESYONU

DEMİRCAN, TURAN; Bedri, Nejda; köroğlu, Nadiye; KESKİN, İlknur

FARE ÖSTRUS SİKLUSU'NUN FARKLI FAZLARINDA PLIN2 VE PLIN3 EKSPRESYONU

İlknur KESKİN, (İstanbul Medipol Üniversitesi, Tıp Fakültesi, Histoloji ve Embriyoloji Anabilim Dalı, İstanbul, Türkiy)

Turan DEMİRCAN, (İstanbul Medipol Üniversitesi, Tıp Fakültesi, Tıbbi Biyoloji Anabilim Dalı, İsyanbul, Türkiye)

Nejda BEDRİ, (İstanbul Sağlık Bilimleri Üniversitesi, Kanuni Sultan Süleyman Eğitim ve Araştırma Hastanesi, Kadın Hastalıkları ve Doğum Anabilim Dalı, istanbul, Türkiye)

Nadiye KÖROĞLU (İstanbul Medipol Üniversitesi, Tıp Fakültesi, Rejeneratif Ve Restoratif Tıp Araştırmaları Merkezi (REMER), Türkiye)

Haydarpaşa Numune Eğitim ve Araştırma Hastanesi Tıp Dergisi

2 1

Yıl: 2016 Cilt: 56 Sayı: 3 Sayfa Aralığı: 131 - 142 Metin Dili: Türkçe İndeks Tarihi: 29-07-2022

FARE ÖSTRUS SİKLUSU'NUN FARKLI FAZLARINDA PLIN2 VE PLIN3 EKSPRESYONU

Öz:

Giriş: Puberteye kadar birinci mayozun profaz evresinde bekleyen primordiyal foliküllerden birkaçı puberte ile birlikte, hormonal uyarı altında her ay tekrarlayan bir serüvene başlar. Bu süreçte ovaryumun stromal hücreleri de farklılaşarak, lipid droplet (LD) açısından zengin teka hücrelerine farklılaşırlar. Farede bu süreç çok kısadır ve ortalama 4 günde tamamlanır. Hücre içi sitoplazmik yapılar olan LD'ler, hücre içi birçok olayda enerji kaynağı olarak karşımıza çıkmaktadır. Perilipin yağ damlacıklarının yüzeyine lokalize olan fosforilasyon bağımlı bir proteindir ve LD'leri hormona duyarlı lipazın etkisinden korur. Materyal-Metot: Seksüel olarak matür, düzenli östrus siklusuna sahip 24 adet dişi fare vajinal smear sonuçlarına göre 4 gruba ayrıldı; proöstrus, östrus, metöstrus, ve diöstrus. Sakrifiye edilen farelerin overleri alındı. Bir over Hematoksilen Eozin boyama ve PLIN2PLIN3 çift floresan boyama için, diğer over ise Western Blot analiz için kullanıldı.Bulgular: Western Blot analiz sonuçlarına göre PLIN2 ekspresyonu en fazla diöstrus, PLIN3 ekspresyonu ise en fazla diöstrus ve proöstrus fazında ölçüldü. Proöstrus antral folikül oositinde PLIN3 ekspresyonunun aynı PLIN3 ekspresyonlarının fazlar arasında ve aynı faz içinde farklı hücre gruplarında ekspresyon farklılıkları gösterdiklerini gösterdik. Bu da bize bu düzenleme ile oosit ve granüloza hücrelerinin enerji ihtiyacına göre perilipin ekspresyonunu ayarladığını ve enerji rezervini koruduğunu göstermiştir.

Anahtar Kelime:

Konular: Genel ve Dahili Tıp

Expression of PLIN2 and PLIN3 during the different phases of estrous cycle in mouse

Öz:

Introduction: Some primordial follicles which waits at the first meiotic prophase stage till puberty begins a recurring adventure with puberty every month under hormonal stimulation. During this process stromal cells differentiate into theca cells which are rich in terms of lipid droplets (LD). This process is very short, and completed an average of 4 days in mice. LDs, which are intracellular cytoplasmic structures, emerges as an energy source in many intracellular processes. Perilipin, a phosphorylation dependent protein, is localized to the surface of the oil droplets and protects LDs from the effect of the hormone-sensitive lipase.Materials and Methods: 24 female mice that are sexually mature and having regular estrous cycle, were divided into 4 groups according to the vaginal smear results; proestrus, estrus, metestrus, and diestrus. Ovaries of the sacrificed mice were isolated. A single ovary was used for hematoxylin eosin sand PLIN2-PLIN3 double fluorescent staining. The other ovary was used for Western Blot analysis.Results: According to the western blot results, PLIN2 expression was detected at most in diestrus stage, and these phases for PLIN3 are diestrus and proestrus. PLIN3 expression was found to be significantly high in comparison to the different cells in. the same group in proestrus antral follicle oocytes (p <0.05). PLIN3 expression in estrus antral follicles is significantly higher than expressed PLIN3 amount in atretic follicles (p = 0.031). PLIN3 expression in diestrous phase for secondary follicular granulosa cells is significantly higher than proestrus (p = 0.000), estrus (p = 0.001) and metestrus (p = 0.023). PLIN3 expression in secondary follicles oocytes were significantly higher in diestrus phase than the the metestrus phase. PLIN3 expression in estrus phase for pre-antral follicle granulosa cells is significantly higher than proestrus (p=0,005), metestrus (p=0.045) and diestrus (p=0,025). PLIN3 expression level in atretic follicular granulosa cells was significantly higher in estrus phase than the proestrus phase (p = 0.023). Discussion: Ongoing events during the complex process of oocyte maturation, ovulation and fertilization stages require energy. By many studies, cross talking of pathways related to activation of oocytes and regulation of lipid mobilization has been demonstrated. Here, in this study, we exhibit the expression alterations of PLIN2 and PLIN3 in different phases or in diverse cells of the same phase during the estrous cycle. According to this data, we can conclude that, energy requirements of the oocyte and granulosa cells regulates the perilipin expression and maintenance of energy reserves.

Anahtar Kelime:

Konular: Genel ve Dahili Tıp

Belge Türü: Makale Makale Türü: Araştırma Makalesi Erişim Türü: Erişime Açık

Junqueira LC, Carneiro J, Kelley RO. (1998). Dişi Üreme Sis- temi. Temel Histoloji. Ed:Y. Aytekin, S. Solakoğlu, B. Ahıskalı. İstanbul, Barış Kitabevi.
Junqueira LC, Carneiro J. (2006). Dişi Üreme Sistemi. Temel Histoloji. Ed:Y. Aytekin, S. Solakoğlu. İstanbul, Nobel Tıp Ki- tabevi.
Nelson, J. F., et al. (1982). A longitudinal study of estrous cyclicity in aging C57BL/6J mice: I. Cycle frequency, length and vaginal cytology. Biol Reprod 27(2): 327-39.
Safranski TJ, Lamberson WR, Keisler DH. (1993). Correla- tions among three measures of puberty in mice and rela- tionships with estradiol concentration and ovulation. Biol. Reprod.;48(3):669-73.
Petroianu, A., et al. (2005). The influence of venous drainage on autologous ovarian transplantation. J Surg Res 124(2): 175-9.
Hubscher, C. H., et al. (2005). A quantitative method for as- sessing stages of the rat estrous cycle. Biotech Histochem 80(2): 79-87.
Wang, H., et al. (2011). Unique regulation of adipose trigly- ceride lipase (ATGL) by perilipin 5, a lipid droplet-associated protein. J Biol Chem 286(18): 15707-15.
Murphy, D. J. (2001). The biogenesis and functions of lipid bodies in animals, plants and microorganisms. Prog Lipid Res 40(5): 325-438.
Thiele, C. and J. Spandl (2008). Cell biology of lipid droplets. Curr Opin Cell Biol 20(4): 378-85.
Khor, V. K., et al. (2013). Lipid droplet metabolism. Curr Opin Clin Nutr Metab Care 16(6): 632-7.
Tansey, J.T. et al. (2003). Functional studies on native and mutated forms of perilipins. A role in protein kinase A-medi- ated lipolysis of triacylglycerols. J Biol Chem 278, 8401-6.
Marcinkiewicz, A., Gauthier, D., Garcia, A. & Brasaemle, D.L. (2006).The phosphorylation of serine 492 of perilipin a dire- cts lipid droplet fragmentation and dispersion. J Biol Chem 281, 11901-9.
McLean, A. C., et al. (2012). Performing vaginal lavage, crys- tal violet staining, and vaginal cytological evaluation for mou- se estrous cycle staging identification. J Vis Exp(67): e4389.
Wu B, Ignotz GG, Currie WB, Yang X. (1996). Temporal dis- tinctions in the synthesis and accumulation of proteins by oocytes and cumulus cells during maturation in vitro of bo- vine oocytes. Mol Reprod Dev. 45(4):560-5.
Krisher RL. (2004). The effect of oocyte quality on develop- ment. J Anim Sci.;82 E-Suppl:E14-23.
Kimura N, Hoshino Y, Totsukawa K, Sato E. (2007). Cellular and molecular events during oocyte maturation in mammals: molecules of cumulus-oocyte complex matrix and signalling pathways regulating meiotic progression. Soc. Reprod .Fer- til. Suppl. 63:327-42.
Xia GL, Kikuchi K, Noguchi J, Izaike Y. (2000). Short time priming of pig cumulus-oocyte complexes with FSH and for- skolin in the presence of hypoxanthine stimulates cumulus cells to secrete a meiosis-activating substance. Theriogeno- logy. 53(9):1807-15.
Sturmey, R. G., et al. (2006). Fluorescence resonance ener- gy transfer analysis of mitochondrial:lipid association in the porcine oocyte. Reproduction 132(6): 829-37.
Griffin, J., et al. (2006). Comparative analysis of follicle morp- hology and oocyte diameter in four mammalian species (mouse, hamster, pig, and human). J Exp Clin Assist Reprod 3: 2.
Downs, S. M., et al. (2002). A potential role for AMP-acti- vated protein kinase in meiotic induction in mouse oocytes. Dev Biol 245(1): 200-12.
Holm, C. (2003). Molecular mechanisms regulating hormo- ne-sensitive lipase and lipolysis. Biochem Soc Trans 31(Pt 6): 1120-4.
Yang, X., et al. (2010). Identification of Perilipin-2 as a li- pid droplet protein regulated in oocytes during maturation. Reproduction, Fertility and Development 22(8): 1262-71.
Sastre, D., et al. (2014). Expression of PLIN2 and PLIN3 du- ring oocyte maturation and early embryo development in cattle. Theriogenology 81(2): 326-31.
Zhang, R. N., et al. (2014). Expression of Perilipin 2 (PLIN2) in Porcine Oocytes During Maturation. Reproduction in Do- mestic Animals 49(5): 875-80.
Bickel, P. E., et al. (2009). PAT proteins, an ancient family of lipid droplet proteins that regulate cellular lipid stores. Bioc- him Biophys Acta 1791(6): 419-40.
Seachord, C. L., et al. (2005). Adipose differentiation-related protein: a gonadotropin- and prostaglandin-regulated prote- in in primate periovulatory follicles. Biol Reprod 72(6): 1305- 14.
Lee B, Zhu J, Wolins NE, Cheng JX, Buhman KK. (2009). Dif- ferential association of adipophilin and TIP47 proteins with cytoplasmic lipid droplets in Mouse enterocytes during die- tary fat absorption. Biochim Biophys Acta. 1791(12):1173- 80.

APA	KESKİN İ, DEMİRCAN T, Bedri N, köroğlu N (2016). FARE ÖSTRUS SİKLUSU'NUN FARKLI FAZLARINDA PLIN2 VE PLIN3 EKSPRESYONU. , 131 - 142.
Chicago	KESKİN İlknur,DEMİRCAN TURAN,Bedri Nejda,köroğlu Nadiye FARE ÖSTRUS SİKLUSU'NUN FARKLI FAZLARINDA PLIN2 VE PLIN3 EKSPRESYONU. (2016): 131 - 142.
MLA	KESKİN İlknur,DEMİRCAN TURAN,Bedri Nejda,köroğlu Nadiye FARE ÖSTRUS SİKLUSU'NUN FARKLI FAZLARINDA PLIN2 VE PLIN3 EKSPRESYONU. , 2016, ss.131 - 142.
AMA	KESKİN İ,DEMİRCAN T,Bedri N,köroğlu N FARE ÖSTRUS SİKLUSU'NUN FARKLI FAZLARINDA PLIN2 VE PLIN3 EKSPRESYONU. . 2016; 131 - 142.
Vancouver	KESKİN İ,DEMİRCAN T,Bedri N,köroğlu N FARE ÖSTRUS SİKLUSU'NUN FARKLI FAZLARINDA PLIN2 VE PLIN3 EKSPRESYONU. . 2016; 131 - 142.
IEEE	KESKİN İ,DEMİRCAN T,Bedri N,köroğlu N "FARE ÖSTRUS SİKLUSU'NUN FARKLI FAZLARINDA PLIN2 VE PLIN3 EKSPRESYONU." , ss.131 - 142, 2016.
ISNAD	KESKİN, İlknur vd. "FARE ÖSTRUS SİKLUSU'NUN FARKLI FAZLARINDA PLIN2 VE PLIN3 EKSPRESYONU". (2016), 131-142.

APA	KESKİN İ, DEMİRCAN T, Bedri N, köroğlu N (2016). FARE ÖSTRUS SİKLUSU'NUN FARKLI FAZLARINDA PLIN2 VE PLIN3 EKSPRESYONU. Haydarpaşa Numune Eğitim ve Araştırma Hastanesi Tıp Dergisi, 56(3), 131 - 142.
Chicago	KESKİN İlknur,DEMİRCAN TURAN,Bedri Nejda,köroğlu Nadiye FARE ÖSTRUS SİKLUSU'NUN FARKLI FAZLARINDA PLIN2 VE PLIN3 EKSPRESYONU. Haydarpaşa Numune Eğitim ve Araştırma Hastanesi Tıp Dergisi 56, no.3 (2016): 131 - 142.
MLA	KESKİN İlknur,DEMİRCAN TURAN,Bedri Nejda,köroğlu Nadiye FARE ÖSTRUS SİKLUSU'NUN FARKLI FAZLARINDA PLIN2 VE PLIN3 EKSPRESYONU. Haydarpaşa Numune Eğitim ve Araştırma Hastanesi Tıp Dergisi, vol.56, no.3, 2016, ss.131 - 142.
AMA	KESKİN İ,DEMİRCAN T,Bedri N,köroğlu N FARE ÖSTRUS SİKLUSU'NUN FARKLI FAZLARINDA PLIN2 VE PLIN3 EKSPRESYONU. Haydarpaşa Numune Eğitim ve Araştırma Hastanesi Tıp Dergisi. 2016; 56(3): 131 - 142.
Vancouver	KESKİN İ,DEMİRCAN T,Bedri N,köroğlu N FARE ÖSTRUS SİKLUSU'NUN FARKLI FAZLARINDA PLIN2 VE PLIN3 EKSPRESYONU. Haydarpaşa Numune Eğitim ve Araştırma Hastanesi Tıp Dergisi. 2016; 56(3): 131 - 142.
IEEE	KESKİN İ,DEMİRCAN T,Bedri N,köroğlu N "FARE ÖSTRUS SİKLUSU'NUN FARKLI FAZLARINDA PLIN2 VE PLIN3 EKSPRESYONU." Haydarpaşa Numune Eğitim ve Araştırma Hastanesi Tıp Dergisi, 56, ss.131 - 142, 2016.
ISNAD	KESKİN, İlknur vd. "FARE ÖSTRUS SİKLUSU'NUN FARKLI FAZLARINDA PLIN2 VE PLIN3 EKSPRESYONU". Haydarpaşa Numune Eğitim ve Araştırma Hastanesi Tıp Dergisi 56/3 (2016), 131-142.