BİLGE ÖZERMAN EDİS
(İstanbul Üniversitesi)
EBRU HACIOSMANOĞLU
(İstanbul Bilim Üniversitesi)
BAŞAK VAROL
(İstanbul Üniversitesi)
MUHAMMET BEKTAŞ
(İstanbul Üniversitesi)
Yıl: 2018Cilt: 48Sayı: 3ISSN: 0258-2171 / 2458-7516Sayfa Aralığı: 167 - 172Türkçe

119 0
Jasplakinolid ile F-aktin Stabilizasyonu Uygulanan Endotel Hücrelerinde Difteri Toksini Trafiği
Amaç: Ökaryotik hücrelerde mikrofilament yapısının anabileşeni olan aktin, sinyal yolaklarını aktin bağlayan proteinlerle etkileşerek düzenler. Daha önceki çalışmalarımızdadifteri toksini ve mutant difteri toksini (CRM-197) ileenfekte olan endotel hücrelerinde toksinin A fragmenti ileetkileşen filamentöz aktinin depolimerleştiği saptanmıştır.Bu çalışmada endotel hücrelerinde F-aktin stabilizasyonusağlanarak difteri toksininin hücre içi trafiğinin belirlenmesi amaçlanmıştır.Gereç ve Yöntem: Hücre kültüründe endotel hücreleriçoğaltıldı ve jasplakinolid (0.1 µmol/ml) ile sırası ile 30 ve60 dakika uygulandı. Diferi toksini (0.75 nmol/ml) uygulaması için jasplakinolid ile inkübasyon süresi 15 dakika ilesınırlandırıldı. Hücre içi F-aktin stabilizasyonu ve difteritoksini trafiği immünofloresan mikroskopisi ile görüntülendi.Bulgular: Bekletme süresine bağlı olarak stres liflerininjasplakinolid uygulanan endotel hücrelerinin hücre zarında belirginleştiği belirlendi. F-aktin stabilizasyonu sağlanan endotel hücrelerinde difteri toksini trafiğinin engellenmediği ve A fragmenti’nin perinükleer alana yöneldiğigörüntülendi.Sonuç: Hücre içinde F-aktin stabilizasyonu ileG-aktin/F-aktin dönüşümünün engellenmesi difteri toksinitrafiğini durdurmamaktadır. Bu sonuç toksin trafiğindefilamentöz aktinin önemini gösteren çalışmaları desteklemektedir.
Fen > Tıp > Mikrobiyoloji
DergiAraştırma MakalesiErişime Açık
  • 1. Alberts B, Johnson A, Lewis J, et al. Molecular Biology of the Cell. 4th ed. New York: Garland Science, 2002.
  • 2. Lamason RL, Welch MD. Actin-based motility and cell-to-cell spread of bacterial pathogens. Curr Opin Microbiol. 2017;35:48-57. https://doi.org/10.1016/j.mib.2016.11.007
  • 3. Aktories K, Schwan C, Papatheodorou P, Lang AE. Bidirectional attack on the actin cytoskeleton. Bacterial protein toxins causing polymerization or depolymerization of actin. Toxicon. 2012;60(4):572-81. https://doi.org/10.1016/j.toxicon.2012.04.338
  • 4. Collier RJ. Diphtheria toxin: mode of action and structure. Bacteriol Rev. 1975;39(1):54-85.
  • 5. Bektaş M, Varol B, Nurten R, Bermek E. Interaction of diphtheria toxin (fragment A) with actin. Cell Biochem Funct. 2009;27(7):430-9. https://doi.org/10.1002/cbf.1590
  • 6. Lessnick SL, Lyczak JB, Bruce C, et al. Localization of diphtheria toxin nuclease activity to fragment A. J Bacteriol. 1992;174(6):2032-8. https://doi.org/10.1128/jb.174.6.2032-2038.1992
  • 7. Varol B, Özerman Edis B, Bektaş M. Toxin structure, delivery and action. In: Burkovski A, ed. Corynebacterium diphtheriae and related toxigenic species. Netherlands: Springer, 2013:83-94.
  • 8. Schuster M, Schnell L, Feigl P, et al. The Hsp90 machinery facilitates the transport of diphtheria toxin into human cells. Sci Rep. 2017;7(1):613. https://doi.org/10.1038/s41598-017-00780-x
  • 9. Bektaş M, Hacıosmanoğlu E, Özerman B, Varol B, Nurten R, Bermek E. On diphtheria toxin fragment A release into the cytosol–cytochalasin D effect and involvement of actin filaments and eukaryotic elongation factor 2. Int. J. Biochem. Cell Biol. 2011;43(9):1365-72. https://doi.org/10.1016/j.biocel.2011.05.017
  • 10. Varol B, Bektaş M, Nurten R, Bermek E. The cytotoxic effect of diphtheria toxin on the actin cytoskeleton. Cell Mol Biol Lett. 2012;17(1):49-61. https://doi.org/10.2478/s11658-011-0036-6
  • 11. Ünlü A, Bektaş M, Şener S, Nurten R. The interaction between actin and FA fragment of diphtheria toxin. Mol Biol Rep. 2013;40(4):3135-45. https://doi.org/10.1007/s11033-012-2387-0
  • 12. Özerman Edis B, Varol B, Hacıosmanoğlu E, Ünlü A, Bektaş M. Cross-reacting material 197 (CRM197) affects actin cytoskeleton of endothelial cells. Gen Physiol Biophys. 2017;36/4):383-9. https://doi.org/10.4149/gpb_2017006
  • 13. Tojkander S, Gateva G, Lappalainen P. Actin stress fibers–assembly, dynamics and biological roles. J Cell Sci. 2012;125(Pt 8):1855-64. https://doi.org/10.1242/jcs.098087
  • 14. Visegrády B, Lorinczy D, Hild G, Somogyi B, Nyitrai M. A simple model for the cooperative stabilisation of actin filaments by phalloidin and jasplakinolide. FEBS Lett. 2005;579(1):6-10. https://doi.org/10.1016/j.febslet.2004.11.023
  • 15. Greene W, Gao SJ. Actin dynamics regulate multiple endosomal steps during Kaposi’s sarcoma-associated herpesvirus entry and trafficking in endothelial cells. PLoS Pathog. 2009;5(7):e1000512. https://doi.org/10.1371/journal.ppat.1000512
  • 16. Apodaca G. Endocytic traffic in polarized epithelial cells: role of the actin and microtubule cytoskeleton. Traffic. 2001;2(3):149-59. https://doi.org/10.1034/j.1600-0854.2001.020301.x

TÜBİTAK ULAKBİM Ulusal Akademik Ağ ve Bilgi Merkezi Cahit Arf Bilgi Merkezi © 2019 Tüm Hakları Saklıdır.