Sıçan kemik iliği stromal hücrelerinin kültüre edilebilirliği ve osteoblastik formasyonun değerlendirilmesi

BILIR, AYHAN; CEYHAN, Taşkın; Karaca, Cetin

Sıçan kemik iliği stromal hücrelerinin kültüre edilebilirliği ve osteoblastik formasyonun değerlendirilmesi

Taşkın CEYHAN, (Özel Çevre Hastanesi, Ortopedi ve Travmatoloji Bölümü, İstanbul, Türkiye)

Ayhan BİLİR, (İstanbul Üniversitesi, İstanbul Tıp Fakültesi, Histoloji ve Embriyoloji Anabilim Dalı, İstanbul, Türkiye)

Çetin KARACA (İstanbul Üniversitesi, Cerrahpaşa Tıp Fakültesi, Deney Hayvanları Üretim ve Araştırma Merkezi, İstanbul, Türkiye)

Acta Orthopaedica et Traumatologica Turcica

1 0

Yıl: 2006 Cilt: 40 Sayı: 1 Sayfa Aralığı: 67 - 71 Metin Dili: Türkçe İndeks Tarihi: 29-07-2022

Sıçan kemik iliği stromal hücrelerinin kültüre edilebilirliği ve osteoblastik formasyonun değerlendirilmesi

Öz:

Amaç: Bu çalışmada, genç yetişkin sıçan kemik iliği stromal hücrelerinin kültüre edilebilirliği ve kültür hücrelerinin genel histomorfolojik ve osteoblastik formasyon yönünden değerlendirilmesi amaçlandı. Çalışma planı: Yüksek doz eter ile yaşamları sonlandırılan 16 adet 2.5 aylık Wistar cinsi genç erkek sıçanın arka femur ve tibiaları çıkarıldı, metafiz ve medullaları taşıyıcı serumla yıkandı ve toplanan aspirat DME/F12 serumuyla kültüre edildi. Kültür flasklarında medium içindeki ve tabandaki hücreler, fotoğraf ataçmanlı invert mikroskopla incelenerek görüntülendi. Pikro-tionin boyama tekniğiyle boyanan flask tabanındaki hücreler ışık mikroskobuyla incelenerek resimleri çekildi. Yapışık kültür hücreleri tripsinize edilerek çözüldü ve yayma preparatlar hazırlanarak stromal hücrelerin genel histomorfolojik yapıları incelendi. Sonuçlar: Sıçan kemik iliği hücrelerinin kültürde üreme yüzdesi %93.8 (15/16) oranında yüksek bulundu. Kültür flasklarında, zamanla birbirine yapışarak çoğalan farklı morfolojide stromal hücreler ve aralarında pikro-tionin ile boyanan çok nükleoluslu büyük çekirdekli osteoblastlara benzeyen hücreler saptandı. Çıkarımlar: Bulgularımız, kemik iliği hücre kültürlerinde, elde edilen hücrelerin osteoblastlara çok benzediği ve bu hücrelerin çok yönlü farklılaşma yeteneği olan osteoprogenitör hücrelerden köken alabileceği öngörüsünü desteklemektedir.

Anahtar Kelime: Hücreler, kültürlü Sitoloji Kök hücreler Kemik iliği hücreleri Osteoblastlar Sıçan, Wistar

Konular: Genel ve Dahili Tıp

Culturability of rat bone marrow stromal cells and evaluation for osteoblastic formation

Öz:

Objectives: We investigated culturability of bone marrow stromal cells of young mature rats and evaluated cultured cells with regard to histomorphologic features and osteoblastic formation. Methods: Sixteen mature Wistar rats were sacrificed under high dose of ether anesthesia. Their femurs and tibias were removed, medullas and metaphyses were washed with carrier serum and the collected material was cultured in DME/F12 serum. The cells in the test medium and at the bottom of Petri dishes were studied under inverted microscope and were photographed. Then, the cells at the bottom were stained with the picro-thionin technique, examined under light microscope, and photographed. Following trypsinizing, cluster cells were dissolved and smears were prepared for histomorphologic evaluation of stromal cells.Results: Rat bone marrow cells in the culture showed a high percentage of reproducibility (93.8%; 15/16). The stromal cells in Petri dishes were of different morphology, and were interspersed with large multinucleated osteoblast-like cells following staining with the picro-thionin technique. Conclusion: Our findings favor the opinion that cells harvested in bone marrow cell culture are very similar to osteoblastic cells and that they may stem from osteoprogenitor cells which have multifacet differention ability.

Anahtar Kelime: Rats, Wistar Cells, Cultured Cytology Stem Cells Bone Marrow Cells Osteoblasts

Konular: Genel ve Dahili Tıp

Belge Türü: Makale Makale Türü: Araştırma Makalesi Erişim Türü: Bibliyografik

1. Bilir A, Ceyhan T, Altınoz MA, Guneri AD, Bayrak I, Altug T. Culturability of osteoblast cells extracted from mature and fetal BALB/c mice calvaria. [Article in Turkish] Acta Orthop Trauvmatol Turc 2000;34:389-95.
2. Ross MH, Romrell LJ, Kaye GI, editors. Histology: a text and atlas. 3rd ed. Baltimore: Lippincott Williams & Wilkins; l995.
3. Muschler GF, Boehm C, Easley K. Aspiration to obtain osteoblast progenitor cells from human bone marrow: the influence of aspiration volume. J Bone Joint Surg [Am] 1998; 80:302.
4. Dennis JE, Merriam A, Awadallah A, Yoo JU, Johnstone B, Caplan AI. A quadripotential mesenchymal progenitor cell isolated from the marrow of an adult mouse. J Bone Miner Res 1999;14:700-9.
5. Majumdar MK, Thiede MA, Mosca JD, Moorman M, Gerson SL. Phenotypic and functional comparison of cultures of marrow-derived mesenchymal stem cells (MSCs) and stromal cells. J Cell Physiol 1998;176:57-66.
6. Grigoriadis AE, Heersche JN, Aubin JE. Differentiation of muscle, fat, cartilage, and bone from progenitor cells present in a bone-derived clonal cell population: effect of dexamethasone. J Cell Biol 1988;106:2139-51.
7. Encina NR, Billotte WG, Hofmann MC. Immunomagnetic isolation of osteoprogenitors from human bone marrow stroma. Lab Invest 1999;79:449-57.
8. Islam A, Steiner R. Primary culture of marrow core in collagen gels: modulation and transformation of endosteal cells. I. Morphologic observations. J Med 1989;20:241-50.
9. Bruder SP, Kraus KH, Goldberg VM, Kadiyala S. The effect of implants loaded with autologous mesenchymal stem cells on the healing of canine segmental bone defects. J Bone Joint Surg [Am] 1998;80:985-96.
10. Bellows CG, Ciaccia A, Heersche JN. Osteoprogenitor cells in cell populations derived from mouse and rat calvaria differ in their response to corticosterone, cortisol, and cortisone. Bone 1998;23:119-25.
11. Hughes FJ, McCulloch CA. Stimulation of the differentiation of osteogenic rat bone marrow stromal cells by osteoblast cultures. Lab Invest 1991;64:617-22.
12.Yamamoto T, Ecarot B, Glorieux FH. In vivo osteogenic activity of isolated human bone cells. J Bone Miner Res 1991;6:45-51.

APA	CEYHAN T, BILIR A, Karaca C (2006). Sıçan kemik iliği stromal hücrelerinin kültüre edilebilirliği ve osteoblastik formasyonun değerlendirilmesi. , 67 - 71.
Chicago	CEYHAN Taşkın,BILIR AYHAN,Karaca Cetin Sıçan kemik iliği stromal hücrelerinin kültüre edilebilirliği ve osteoblastik formasyonun değerlendirilmesi. (2006): 67 - 71.
MLA	CEYHAN Taşkın,BILIR AYHAN,Karaca Cetin Sıçan kemik iliği stromal hücrelerinin kültüre edilebilirliği ve osteoblastik formasyonun değerlendirilmesi. , 2006, ss.67 - 71.
AMA	CEYHAN T,BILIR A,Karaca C Sıçan kemik iliği stromal hücrelerinin kültüre edilebilirliği ve osteoblastik formasyonun değerlendirilmesi. . 2006; 67 - 71.
Vancouver	CEYHAN T,BILIR A,Karaca C Sıçan kemik iliği stromal hücrelerinin kültüre edilebilirliği ve osteoblastik formasyonun değerlendirilmesi. . 2006; 67 - 71.
IEEE	CEYHAN T,BILIR A,Karaca C "Sıçan kemik iliği stromal hücrelerinin kültüre edilebilirliği ve osteoblastik formasyonun değerlendirilmesi." , ss.67 - 71, 2006.
ISNAD	CEYHAN, Taşkın vd. "Sıçan kemik iliği stromal hücrelerinin kültüre edilebilirliği ve osteoblastik formasyonun değerlendirilmesi". (2006), 67-71.

APA	CEYHAN T, BILIR A, Karaca C (2006). Sıçan kemik iliği stromal hücrelerinin kültüre edilebilirliği ve osteoblastik formasyonun değerlendirilmesi. Acta Orthopaedica et Traumatologica Turcica, 40(1), 67 - 71.
Chicago	CEYHAN Taşkın,BILIR AYHAN,Karaca Cetin Sıçan kemik iliği stromal hücrelerinin kültüre edilebilirliği ve osteoblastik formasyonun değerlendirilmesi. Acta Orthopaedica et Traumatologica Turcica 40, no.1 (2006): 67 - 71.
MLA	CEYHAN Taşkın,BILIR AYHAN,Karaca Cetin Sıçan kemik iliği stromal hücrelerinin kültüre edilebilirliği ve osteoblastik formasyonun değerlendirilmesi. Acta Orthopaedica et Traumatologica Turcica, vol.40, no.1, 2006, ss.67 - 71.
AMA	CEYHAN T,BILIR A,Karaca C Sıçan kemik iliği stromal hücrelerinin kültüre edilebilirliği ve osteoblastik formasyonun değerlendirilmesi. Acta Orthopaedica et Traumatologica Turcica. 2006; 40(1): 67 - 71.
Vancouver	CEYHAN T,BILIR A,Karaca C Sıçan kemik iliği stromal hücrelerinin kültüre edilebilirliği ve osteoblastik formasyonun değerlendirilmesi. Acta Orthopaedica et Traumatologica Turcica. 2006; 40(1): 67 - 71.
IEEE	CEYHAN T,BILIR A,Karaca C "Sıçan kemik iliği stromal hücrelerinin kültüre edilebilirliği ve osteoblastik formasyonun değerlendirilmesi." Acta Orthopaedica et Traumatologica Turcica, 40, ss.67 - 71, 2006.
ISNAD	CEYHAN, Taşkın vd. "Sıçan kemik iliği stromal hücrelerinin kültüre edilebilirliği ve osteoblastik formasyonun değerlendirilmesi". Acta Orthopaedica et Traumatologica Turcica 40/1 (2006), 67-71.