Farklı dönemlerdeki in vivo üretilmiş sığır embriyolarında cinsiyetin dağılımının belirlenmesi ve cinsiyetin bu dağılıma etkisinin araştırılması

AKYOL, NUMAN; KIZIL, Sedat Hamdi; SATILMIŞ, MUHARREM; Karasahin, Tahir

Farklı dönemlerdeki in vivo üretilmiş sığır embriyolarında cinsiyetin dağılımının belirlenmesi ve cinsiyetin bu dağılıma etkisinin araştırılması

Tahir KARAŞAHİN, (Gıda, Tarım ve Hayvancılık Bakanlığı, Hayvancılık Merkez Araştırma Enstitüsü Müdürlüğü, Ankara, Türkiye)

Muharrem SATILMIŞ, (Gıda, Tarım ve Hayvancılık Bakanlığı, Hayvancılık Merkez Araştırma Enstitüsü Müdürlüğü, Ankara, Türkiye)

Sedat Hamdi KIZIL, (Gıda, Tarım ve Hayvancılık Bakanlığı, Hayvancılık Merkez Araştırma Enstitüsü Müdürlüğü, Ankara, Türkiye)

Numan AKYOL (Kırıkkale Üniversitesi, Veteriner Fakültesi, Dölerme ve Suni Tohumlama Anabilim Dalı, Kırıkkale-Türkiye)

Erciyes Üniversitesi Veteriner Fakültesi Dergisi

4 0

Yıl: 2013 Cilt: 10 Sayı: 2 Sayfa Aralığı: 87 - 91 Metin Dili: Türkçe İndeks Tarihi: 29-07-2022

Farklı dönemlerdeki in vivo üretilmiş sığır embriyolarında cinsiyetin dağılımının belirlenmesi ve cinsiyetin bu dağılıma etkisinin araştırılması

Öz:

Bu çalışmanın konusu, farklı dönemlerdeki in vivo sığır embriyolarının cinsiyetlerinin non elektroforetik PCR yön- temi ile tespit edilerek, cinsiyet dağılımının ve bu dağılımın arasındaki farkların cinsiyetten etkilenip etkilenmediğinin belirlenmesidir. Cinsiyet tayini amacıyla yedi günlük toplam 65 adet in vivo üretilmiş embriyo kullanıldı. Embriyo elde etmek için rutin süperovulasyon yöntemleri kullanıldı. Tohumlamalardan yedi gün sonra cerrahi olmayan yöntemle uterus yıkaması yapılarak embriyolar toplandı. Elde edilen embriyolar kalite değerlendirmesinin ardından cinsiyetleri tespit edildi. Embriyoların trophektoderm kısmından mikro manipülatöre bağlı mikro bıçak ile %10-30 oranında bir par- ça kesilerek biyopsi materyali alındı. Embriyodan biyopsi alma işlemi %20 FCS içeren D-PBS solüsyonu içerisinde yapıldı. Alınan biyopsi parçaları, lizis ve denaturasyon işlemleri amacıyla PCR cihazına yerleştirildi. Lizisi takiben DNA amplifikasyon işlemi 35 döngü olarak gerçekleştirildi. PCR cihazından çıkarılan tüpler, 302-312 nm dalga boyunda ışık veren UV lamba altında incelendi. Pembe renk veren embriyo “erkek embriyo” olarak belirlendi. Cinsiyet tayini yapılan embriyolardan kompakt morula aşamasında olan 30 embriyodan 14’ünün erkek (%46.7; 14/30), 16’sının dişi (%53.3; 16/30) cinsiyette; blastosist aşamasındaki 35 embriyodan 21’inin erkek (%60.0; 21/35), 14’ünün dişi (%40.0; 14/35) cinsiyete sahip olduğu tespit edildi. Blastosist aşamasındaki erkeklerin oranının (%60.0) morula aşamasına (%46.7) göre daha yüksek bulunmasına rağmen aralarındaki farklılık istatistik önemde bulunmamıştır (P>0.05).

Anahtar Kelime:

Konular: Biyoloji

Investigation of sex distribution and the effect of sex to this distribution on in vivo produced bovine embryos at different stages

Öz:

The objective of this study is to investigate whether sex distribution and the variance of this distribution are affected by sex. Sex detection of in vivo produced bovine embryos at different stages was made using non- electrophoretic PCR method. For sexing; in vivo derived day-seven 65 embryos were used. Embryos were obtained from routine superovulation procedure. After seven days of artificial insemination; embryos were collected by nonsurgical uterine flushing technique. The sex of the embryos was determined; following evaluation of the quality of embryos. 10-30% of the trophectoderm of the embryo was excised with a micro blade attached to the micro manipulator. Embryo biopsy procedure was carried out in D-PBS solution containing 20% FCS. The biopsy materials were placed in PCR instrument for lysis and denaturation. After lysis period, DNA amplification process was carried out in 35 cycles. The tubes taken out of the PCR instrument were inspected under UV illumination of 302-312 nm wave length. Pink fluorescence indicates the presence of a male sample. As a result of the sex determination out of 30 embryos; 14 male (46.7%; 14/30), 16 female (53.3%; 16/30) were determined at compact morula stage, out of 35 embryos; 21 male (60.0%; 21/35), 14 female (40.0%; 14/35) were determined at blastocyst stage. Even though the rate of males (60%) at blastocyst stage was higher than that at morula stage (46.7%), the difference was not found statistically significant (P>0.05).

Anahtar Kelime:

Konular: Biyoloji

Belge Türü: Makale Makale Türü: Araştırma Makalesi Erişim Türü: Erişime Açık

1. Avery B, Claus BJ, Madison V, Greve T. Morphological development and sex of bovine in vitro fertilized embryos. Mol Reprod Dev 1992; 32: 265-70.
2. Bredbacka P, Veimala R, Peippo J. Survival of biopsied and sexed bovine demi-embryos. Theriogenology 1994; 41: 1023-31.
3. Bredbacka P, Kankaanpaa A, Peippo, J. PCR sexing of bovine embryos: A simplified protocol. Theriogenology 1995; 44: 167-76.
4. Garcia JF, Nogueira MFG, Pupim F, Pantano T, Visintin JA. Pregnancy rates of blastomere biopsied bovine embryos frozen in ethylene glycol. Theriogenology 1997; 47: 268.
5. Hasler JF, Cardey E, Stokes JE, Bredbacka P. Nonelectrophoretic PCR-sexing of bovine embryos in a commercial environment. Theriogenology 2002; 58: 1457-69.
6. Hassun PA, Mello MRB, Porto LPC, Garcia JF. Bovine embryo sexing by primer extension preamplification polymerase chain reaction. Theriogenology 1999; 51: 398.
7. Jafar SI, Flint APF. Sex selection in mammals: A review. Theriogenology 1996; 46: 191-200.
8. King WA, Yadav BR, Xu KP, Picard L, Sirard MA, Supplizi AV, Betteridge KJ. The sex ratios of bovine embryos produced in vivo and in vitro. Theriogenology 1991; 36: 779-88.
9. Kitiyanant Y, Saikhun J, Siriaroonrat B, Pavasuthipaisit K. Sex determination by polymerase chain reaction and karyotyping of bovine embryos at first cleavage in vitro. Scienceasia 2000; 26: 9-13.
10. Kobayashi J, Sekimoto A, Uchida H, Wada T, Sasaki K, Sasada H, Umezu M, Sato E. Rapid detection of male-spesific DNA sequence in bovine embryos using fluorescence in situ hybridization. Mol Reprod Dev 1998; 51: 390- 4.
11. Machaty Z, Paldi A, Csaki T, Varga Z, Kiss I, Barandi Z, Vajta G. Biopsy and sex determination by PCR of IVF bovine embryos. J Reprod Fertil 1993; 98: 467-70.
12. Park JH, Lee JH, Choi KM, Joung SY, Kim JY, Chung GM, Jin DI, Im KS. Rapid sexing of preimplantation bovine embryo using consecutive and multiplex polymerase chain reaction (PCR) with biopsied single blasto- mere. Theriogenology 2001; 55: 1843-53.
13. Rens W, Welch GR, Johnson LA. Improved flow cytometric sorting of X and Y chromosome bearing sperm: Substantiol increase in yield of sexed semen. Mol Reprod Dev 1999; 52: 50-6.
14. Shea BF. Determining the sex of bovine embryos using polymerase chain reaction results: A six-year retrospective study. Theriogenology 1999; 51: 841-54.
15. Şendağ S, Aydın İ, Çelik HA. İneklerde prenatal embriyonik/fötal cinsiyetin belirlen- mesi. Erciyes Üniv Vet Fak Derg 2005; 2(1): 39-44.
16. Thibier M, Nibart M. The sexing of bovine embryos in the field. Theriogenology 1995; 43: 71-80.
17. Tominaga K. Cryopreservation and sexing of in vivo and in vitro produced bovine embryos for their practical use. J Reprod Develop 2004; 50: 29-38.
18. Utsumi K, Kawamoto T, Kim JH, Iritani A, Sakai A, Komano T. Sex determination of bovine embryos by the polymerase chain reaction using Y spesific primers. J Reprod Develop 1992; 38: 35-43.

APA	Karasahin T, SATILMIŞ M, KIZIL S, AKYOL N (2013). Farklı dönemlerdeki in vivo üretilmiş sığır embriyolarında cinsiyetin dağılımının belirlenmesi ve cinsiyetin bu dağılıma etkisinin araştırılması. , 87 - 91.
Chicago	Karasahin Tahir,SATILMIŞ MUHARREM,KIZIL Sedat Hamdi,AKYOL NUMAN Farklı dönemlerdeki in vivo üretilmiş sığır embriyolarında cinsiyetin dağılımının belirlenmesi ve cinsiyetin bu dağılıma etkisinin araştırılması. (2013): 87 - 91.
MLA	Karasahin Tahir,SATILMIŞ MUHARREM,KIZIL Sedat Hamdi,AKYOL NUMAN Farklı dönemlerdeki in vivo üretilmiş sığır embriyolarında cinsiyetin dağılımının belirlenmesi ve cinsiyetin bu dağılıma etkisinin araştırılması. , 2013, ss.87 - 91.
AMA	Karasahin T,SATILMIŞ M,KIZIL S,AKYOL N Farklı dönemlerdeki in vivo üretilmiş sığır embriyolarında cinsiyetin dağılımının belirlenmesi ve cinsiyetin bu dağılıma etkisinin araştırılması. . 2013; 87 - 91.
Vancouver	Karasahin T,SATILMIŞ M,KIZIL S,AKYOL N Farklı dönemlerdeki in vivo üretilmiş sığır embriyolarında cinsiyetin dağılımının belirlenmesi ve cinsiyetin bu dağılıma etkisinin araştırılması. . 2013; 87 - 91.
IEEE	Karasahin T,SATILMIŞ M,KIZIL S,AKYOL N "Farklı dönemlerdeki in vivo üretilmiş sığır embriyolarında cinsiyetin dağılımının belirlenmesi ve cinsiyetin bu dağılıma etkisinin araştırılması." , ss.87 - 91, 2013.
ISNAD	Karasahin, Tahir vd. "Farklı dönemlerdeki in vivo üretilmiş sığır embriyolarında cinsiyetin dağılımının belirlenmesi ve cinsiyetin bu dağılıma etkisinin araştırılması". (2013), 87-91.

APA	Karasahin T, SATILMIŞ M, KIZIL S, AKYOL N (2013). Farklı dönemlerdeki in vivo üretilmiş sığır embriyolarında cinsiyetin dağılımının belirlenmesi ve cinsiyetin bu dağılıma etkisinin araştırılması. Erciyes Üniversitesi Veteriner Fakültesi Dergisi, 10(2), 87 - 91.
Chicago	Karasahin Tahir,SATILMIŞ MUHARREM,KIZIL Sedat Hamdi,AKYOL NUMAN Farklı dönemlerdeki in vivo üretilmiş sığır embriyolarında cinsiyetin dağılımının belirlenmesi ve cinsiyetin bu dağılıma etkisinin araştırılması. Erciyes Üniversitesi Veteriner Fakültesi Dergisi 10, no.2 (2013): 87 - 91.
MLA	Karasahin Tahir,SATILMIŞ MUHARREM,KIZIL Sedat Hamdi,AKYOL NUMAN Farklı dönemlerdeki in vivo üretilmiş sığır embriyolarında cinsiyetin dağılımının belirlenmesi ve cinsiyetin bu dağılıma etkisinin araştırılması. Erciyes Üniversitesi Veteriner Fakültesi Dergisi, vol.10, no.2, 2013, ss.87 - 91.
AMA	Karasahin T,SATILMIŞ M,KIZIL S,AKYOL N Farklı dönemlerdeki in vivo üretilmiş sığır embriyolarında cinsiyetin dağılımının belirlenmesi ve cinsiyetin bu dağılıma etkisinin araştırılması. Erciyes Üniversitesi Veteriner Fakültesi Dergisi. 2013; 10(2): 87 - 91.
Vancouver	Karasahin T,SATILMIŞ M,KIZIL S,AKYOL N Farklı dönemlerdeki in vivo üretilmiş sığır embriyolarında cinsiyetin dağılımının belirlenmesi ve cinsiyetin bu dağılıma etkisinin araştırılması. Erciyes Üniversitesi Veteriner Fakültesi Dergisi. 2013; 10(2): 87 - 91.
IEEE	Karasahin T,SATILMIŞ M,KIZIL S,AKYOL N "Farklı dönemlerdeki in vivo üretilmiş sığır embriyolarında cinsiyetin dağılımının belirlenmesi ve cinsiyetin bu dağılıma etkisinin araştırılması." Erciyes Üniversitesi Veteriner Fakültesi Dergisi, 10, ss.87 - 91, 2013.
ISNAD	Karasahin, Tahir vd. "Farklı dönemlerdeki in vivo üretilmiş sığır embriyolarında cinsiyetin dağılımının belirlenmesi ve cinsiyetin bu dağılıma etkisinin araştırılması". Erciyes Üniversitesi Veteriner Fakültesi Dergisi 10/2 (2013), 87-91.